中文

English

甘油菌种复苏与保藏步骤 - 尊龙凯时人生就博提供专业指导

发布时间:2025-02-26   信息来源:诸娥彦

菌种保藏(culture preservation)是确保微生物菌株活力与遗传特性的关键技术,尤其在生物医疗领域,其重要性不可小觑。特别是在基因编辑技术日益发展之际,经过改造的菌种显得尤为珍贵且数量有限。因此,妥善保藏这些菌种显得尤为重要,以下便是具体的操作步骤。

甘油菌种复苏与保藏步骤 - 尊龙凯时人生就博提供专业指导

菌种保藏操作步骤

首先,将待保存的菌液与配置好的甘油混合液按1:1的比例混合,最终确保得到20%甘油浓度的溶液。接下来,配制40%(v/v)甘油与灭菌水的混合液。然后,取2ml离心管或保菌管,在其中加入500微升的40%甘油-水混合液。

接着,使用移液枪吸取500微升的菌液,并将枪头深入液体表面以下缓慢加入。完成后,将离心管或保菌管放入-80℃的冰箱中保存。为了后续识别,在保菌管上清楚地标明日期、菌种及抗性信息。

菌液复苏步骤

在需要进行后续操作时,首先取含有抗性的LB培养基,每个培养管中加入约八毫升。所有操作须在无菌操作台中进行,以避免污染。向每管中加入100微升的菌液,然后在37℃、180rpm下摇晃培养12小时。

氨苄抗性溶液的配置可通过将1g氨苄青霉素钠溶解于10ml灭菌水中,过滤后保存于-20℃。同时,LB培养基的配置方法为:将10g氯化钠、10g胰蛋白胨和5g酵母提取物溶解在一升的体积中,然后分装到250ml的锥形瓶中,每瓶100ml。随后,为培养基加入100微升的氨苄抗性,确保培养基的抗性功能。

通过这些简单的步骤,您可以有效地保藏和复苏珍贵的菌种,为生物医疗研究提供坚实的基础。强大的技术支持和精准的操作流程,让尊龙凯时人生就博成为您在生物医疗领域的可靠选择。